Protein merah Pyrogallic dalam air kencing

Prinsip kaedah ini adalah berdasarkan ukuran fotometrik ketumpatan optik daripada penyelesaian kompleks berwarna yang terbentuk oleh interaksi molekul protein dengan molekul kompleks pewarna merah pyrogallol dan natrium molybdate (kompleks Pyrogallol Red-Molybdate) dalam medium berasid. Keamatan warna penyelesaian adalah berkadar dengan kandungan protein dalam bahan di bawah kajian. Kehadiran detergen di dalam reagen memberikan takrifan yang setara dengan protein yang mempunyai sifat dan struktur yang berlainan.

Reagen. 1) 1.5 mmol / l larutan pyrogallol merah (PGK): 60 mg PGK dibubarkan dalam 100 ml metanol. Simpan pada suhu 0-5 ° C; 2) larutan penyangga 50 mmol / l succinate pH 2.5: 5.9 g asid succinic (HOOC - CH2-SM2-COOH); 0.14 g natrium oksalat (Na2C2O4) dan 0.5 g natrium benzoat (C6H5COONa) dibubarkan dalam 900 ml air sulingan; 3) larutan 10 mmol / l crystallohydrate natrium molybdate (Na2Moo4 × 2H2O): 240 mg natrium molibdat dibubarkan dalam 100 ml air suling; 4) Reagen bekerja: hingga 900 ml larutan penyumbat succinate tambah 40 ml larutan PHC dan 4 ml larutan natrium molibdat. PH larutan diselaraskan kepada 2.5 dengan larutan 0.1 mol / l asid hidroklorik (HCl) dan isipadunya diselaraskan kepada 1 l. Reagen dalam bentuk ini sedia untuk digunakan dan stabil apabila disimpan di tempat yang gelap dan pada suhu 2-25 ° C selama 6 bulan; 5) larutan albumin standard 0.5 g / l.

Kursus penentuan. 0.05 ml air kencing yang dikaji dimasukkan ke dalam tiub ujian pertama, 0.05 ml larutan piawai albumin ditambah pada tiub ujian kedua dan 0.05 ml air suling ke tiub ujian ketiga (sampel kawalan), maka 3 ml reagen bekerja ditambah pada tiub ujian ini. Kandungan tiub bercampur-campur dan selepas 10 minit, sampel dan piawai akan difotasikan dari sampel kawalan pada panjang gelombang 596 nm dalam cuvette dengan panjang jalur optik 10 mm.

Pengiraan kepekatan protein dalam sampel air kencing dianalisis mengikut formula:

di mana C adalah kepekatan protein dalam sampel air kencing dianalisis, g / l; Apr dan ast- kepupusan sampel air kencing dan larutan albumin standard, g / l; 0.5 - kepekatan larutan albumin standard, g / l.

  • warna penyelesaian (kompleks warna) stabil selama satu jam;
  • hubungan berkadar secara langsung antara kepekatan protein dalam sampel dan penyerapan larutan bergantung kepada jenis fotometer;
  • apabila kandungan protein dalam air kencing berada di atas 3 g / l, sampel dicairkan dengan larutan natrium klorida isotonik (9 g / l) dan penentuannya diulang. Tahap pencairan diambil kira apabila menentukan kepekatan protein.

3. Penentuan protein.

Prinsip kaedah ini berdasarkan pembekuan protein dalam air kencing dengan kehadiran asid nitrik (atau 20% sulfosalicylic).

Kemajuan kerja: hingga 5 titis air kencing tambah 1-2 titis asid nitrik (atau sulfosalicylic). Di hadapan protein dalam air kencing muncul kekeruhan.

Jadual Pengesanan komponen patologi air kencing.

Nota: di hadapan glukosa dan protein dalam air kencing yang diperiksa, kandungan kuantitatif mereka ditentukan.

Penentuan kuantitatif protein dalam air kencing dengan kaedah colorimetric dengan pyrogallol merah.

Prinsip kaedah ini: Apabila protein berinteraksi dengan pyrogallol merah dan natrium molybdate, kompleks berwarna dibentuk, keamatan warna, yang berkadaran dengan kepekatan protein dalam sampel.

Reagen: Reagen bekerja - larutan merah pyrogallol dalam penyangga succinate, penyelesaian protein penentukuran dengan kepekatan 0.50 g / l

Campurkan sampel, tunggu selama 10 minit. pada suhu bilik (18-25 ° C). Ukur kepadatan optik yang dialami (Dop) dan sampel penentukuran (Dkepada) terhadap sampel kawalan pada λ = 598 (578-610) nm. Pewarna stabil selama 1 jam.

Pengiraan: kepekatan protein dalam air kencing (C) g / l dikira dengan formula:

Nilai biasa: sehingga 0.094 g / l, (0.141 g / hari)

Penentuan kuantitatif glukosa dalam air kencing dengan kaedah glukosa oksidase.

Prinsip kaedah ini: Apabila D-glukosa dioksidakan oleh oksigen atmosfera di bawah tindakan oksidase glukosa, jumlah equimolar hidrogen peroksida terbentuk. Di bawah tindakan peroksidase, hidrogen peroksida mengoksidakan substrat kromogenik (campuran fenol dan 4 aminoantipirin - 4AG) dengan pembentukan produk berwarna. Keamatan warna adalah berkadar dengan kandungan glukosa.

2 N2Oh2 + phenol + 4AH sebatian berwarna + 4N2Oh

Kemajuan kerja: 1 ml penyelesaian kerja dan 0.5 ml buffer fosfat dimasukkan ke dalam dua tiub. 0.02 ml air kencing ditambah ke tiub pertama, dan 0.02 ml calibrator ditambah kepada kedua (penentukuran, larutan glukosa piawai, 10 mmol / l). Sampel bercampur, diinkubasi selama 15 minit pada suhu 37 ° C dalam termostat, dan kepadatan optik diukur oleh eksperimen (Dop) dan penentukuran (Dkepada) sampel terhadap reagen bekerja pada panjang gelombang 500-546 nm.

Kandungan glukosa dalam air kencing setiap hari ditentukan oleh mmol / hari dengan mendarabkan hasil yang diperolehi oleh jumlah air kencing yang dikumpulkan setiap hari.

Nota Apabila kandungan gula dalam air kencing lebih daripada 1%, ia mesti dicairkan.

Pada masa ini, makmal biokimia menggunakan kaedah bersatu untuk menganalisis urin untuk glukosa menggunakan ujian glukosa ujian glukosa reaktif atau menggunakan jalur ujian gabungan untuk PH, protein, glukosa, badan keton dan darah. Jalur ujian, direndam dalam sebuah kapal dengan air kencing selama 1 saat. dan bandingkan warna pada skala.

Kami merawat hati

Rawatan, simptom, ubat

Protein merah Pyrogallic dalam air kencing

02.26.2009

Kurilyak O.A., Ph.D.

Biasanya, protein diekskresikan dalam air kencing dalam jumlah yang agak kecil, biasanya tidak melebihi 100-150 mg / hari.

Diuresis harian dalam orang yang sihat adalah 1000-1500 ml / hari; Oleh itu, kepekatan protein di bawah keadaan fisiologi adalah 8-10 mg / dL (0.08-0.1 g / l).

Jumlah protein air kencing diwakili oleh tiga pecahan utama - albumin, mucoprotein dan globulin.

Albumin urin adalah bahagian albumin serum yang telah ditapis dalam glomeruli dan tidak diserap semula di tubula buah pinggang; Pengeluaran albumin kencing normal kurang dari 30 mg / hari. Satu lagi sumber utama protein dalam air kencing ialah tubulus buah pinggang, terutamanya bahagian distal tubula. Tubul ini merembes dua pertiga daripada jumlah protein kencing; daripada jumlah ini, kira-kira 50% diwakili oleh glikoprotein Tamm-Horsfall, yang dirembeskan oleh epitel tubulus distal dan memainkan peranan penting dalam pembentukan batu kencing. Protein lain terdapat di dalam air kencing dalam jumlah yang kecil dan berasal dari protein plasma berat molekul rendah yang ditapis melalui penapis buah pinggang, yang tidak diserap semula di tubula buah pinggang, mikroglobulin dari epitelium tubula buah pinggang (RTE), serta pelepasan prostat dan vagina.

Proteinuria, iaitu, peningkatan dalam kandungan protein dalam air kencing adalah salah satu gejala yang paling penting, yang mencerminkan kerosakan buah pinggang. Walau bagaimanapun, beberapa keadaan lain juga boleh disertai oleh proteinuria. Oleh itu, terdapat dua kumpulan utama proteinuria: proteinuria buah pinggang (benar) dan extrarenal (palsu).

Dalam proteinuria buah pinggang, protein memasuki air kencing terus dari darah kerana peningkatan kebolehtelapan penapis glomerular. Proteinuria renal sering dijumpai di glomerulonephritis, nephrosis, pyelonephritis, nephrosclerosis, amyloidosis buah pinggang, pelbagai bentuk nefropati, contohnya nefropati wanita hamil, keadaan demam, tekanan darah tinggi, dll. Proteinuria juga boleh didapati di kalangan orang yang sihat selepas melakukan senaman fizikal yang teruk, hipotermia, dan tekanan psikologi. Pada bayi yang baru lahir, proteinuria fisiologi diperhatikan pada minggu pertama kehidupan, dan apabila asthenia berlaku pada kanak-kanak dan remaja, proteinuria ortostatik (dalam kedudukan tegak badan) mungkin digabungkan dengan pertumbuhan pesat antara umur 7 dan 18 tahun.

Dalam kes proteinuria palsu (extrarenal), sumber protein dalam air kencing adalah campuran leukosit, eritrosit, sel epitelium urothelia saluran kencing. Pereputan unsur-unsur ini, terutamanya yang dinyatakan dengan air kencing alkali, membawa kepada kemasukan protein ke dalam air kencing, yang telah melewati penapis buah pinggang. Tahap utama proteinuria palsu memberikan darah dalam air kencing, dengan hematuria yang banyak, ia dapat mencapai 30 g / l dan lebih. Penyakit yang boleh disertai proteinuria extrarenal - urolithiasis, tuberkulosis buah pinggang, buah pinggang atau saluran kencing, sistitis, pyelitis, prostatitis, urethritis, vulvovaginitis.

Klasifikasi klinikal termasuk proteinuria cahaya (kurang daripada 0.5 g / hari), sederhana (dari 0.5 hingga 4 g / hari), atau teruk (lebih daripada 4 g / hari).

Kebanyakan pesakit dengan penyakit buah pinggang, seperti glomerulonephritis akut atau pyelonephritis, mendedahkan proteinuria sederhana, tetapi pesakit dengan sindrom nefrotik biasanya mengeluarkan lebih daripada 4 g protein dalam air kencing setiap hari.

Pelbagai kaedah digunakan untuk penentuan kuantitatif protein, khususnya kaedah Brandberg-Roberts-Stolnikov yang bersatu, kaedah biuret, kaedah asid sulfosalicylic, kaedah menggunakan pewarna biru Coomassie, pewarna merah pyrogallol, dan sebagainya.

Penggunaan pelbagai kaedah untuk menentukan protein dalam air kencing telah menyebabkan kekeliruan yang serius dalam tafsiran batasan kandungan protein dalam air kencing. Oleh kerana 2 kaedah yang paling biasa digunakan dalam makmal - dengan asid sulfosalicylic dan pewarna merah pyrogallol, kami menganggap masalah ketepatan batas-batas norma untuk mereka. Dari sudut pandangan kaedah sulfosalicylic dalam air kencing normal, kandungan protein tidak boleh melebihi 0.03 g / l, dan dari sudut pyrogallol, 0.1 g / l! Perbezaan tiga kali ganda.

Nilai rendah kepekatan normal protein dalam air kencing apabila menggunakan sulfosalicylic kerana perkara-perkara berikut:

  • keluk penentukuran adalah berdasarkan larutan akueus albumin. Urin dalam komposinya sangat berbeza dengan air: pH, garam, sebatian berat molekul yang rendah (kreatinin, urea, dan sebagainya). Akibatnya, menurut Altshuler, Rakov dan Tkachev, kesilapan dalam menentukan protein air kencing boleh 3 kali atau lebih! Ya Keputusan penentuan yang betul boleh diperolehi hanya dalam kes-kes tersebut apabila air kencing mempunyai berat badan yang sangat rendah dan dalam komposisi dan pendekatan air pH;
  • kepekaan yang lebih tinggi daripada kaedah sulfosalicylic kepada albumin berbanding dengan protein lain (pada masa itu, seperti yang disebutkan di atas, albumin dalam sampel air kencing yang normal tidak mengandungi lebih daripada 30% daripada jumlah protein air kencing);
  • jika pH urin dipindahkan ke sisi alkali, asid sulfosalicylic dinentralisasi, yang juga menyebabkan penurunan dalam penentuan protein;
  • Kadar pemendapan precipitates tertakluk kepada variasi yang ketara - pada kepekatan protein yang rendah, pemendakan menjadi perlahan, dan penamatan awal tindak balas mengarah kepada meremehkan hasilnya;
  • kadar tindak balas pemendakan pada dasarnya bergantung pada pencampuran campuran reaksi. Pada kepekatan protein yang tinggi, gemetar dari tiub boleh membawa kepada pembentukan kepingan besar dan hujan pesatnya.

Semua ciri-ciri yang disenaraikan di dalam kaedah ini membawa kepada pengurangan yang signifikan terhadap kepekatan protein yang ditentukan dalam air kencing. Tahap yang kurang dilaporkan amat bergantung kepada komposisi sampel air kencing tertentu. Oleh kerana kaedah asid sulfosalicylic memberikan nilai yang kurang konsentrasi terhadap kepekatan protein, batasan biasa untuk kaedah ini adalah 0.03 g / l, kira-kira tiga kali terlalu rendah berbanding dengan data yang diberikan dalam buku rujukan asing mengenai diagnostik makmal klinikal.

Kebanyakan makmal di negara Barat telah meninggalkan penggunaan kaedah sulfosalicylic untuk menentukan kepekatan protein dalam air kencing dan secara aktif menggunakan kaedah pyrogallol untuk tujuan ini. Kaedah pyrogallol untuk menentukan kepekatan protein dalam air kencing dan cecair biologi lain adalah berdasarkan prinsip fotometrik mengukur ketumpatan optik kompleks berwarna yang terbentuk oleh interaksi molekul protein dengan pewarna merah pyrogallol dan molekul kompleks natrium molibidat (Pyrogallol Red - Molybdate complex).

Mengapa kaedah pyrogallol membolehkan untuk mendapatkan keputusan yang lebih tepat untuk mengukur kepekatan protein dalam air kencing? Pertama, disebabkan oleh kepelbagaian pencairan sampel air kencing dalam campuran reaksi. Jika dalam kaedah sulfosalicylic nisbah sampel / reagen urin adalah 1/3, maka dalam kaedah pyrogallol ia boleh berada dalam julat dari 1 / 12.5 hingga 1/60, bergantung kepada varian teknik, yang dengan ketara mengurangkan kesan komposisi air kencing pada hasil pengukuran. Kedua, reaksi berlaku dalam penampan succinate, iaitu, pada pH yang stabil. Dan, akhirnya, prinsip prinsip itu boleh dikatakan lebih "telus". Sodium molybdate dan pyrogallol pewarna merah membentuk kompleks dengan molekul protein. Ini membawa kepada fakta bahawa molekul pewarna dalam keadaan bebas yang tidak menyerap cahaya pada panjang gelombang 600 nm dalam kombinasi dengan protein menyerap cahaya. Oleh itu, kita nampaknya menandakan setiap molekul protein dengan pewarna dan sebagai hasilnya kita dapati bahawa perubahan ketumpatan optik campuran tindak balas pada panjang gelombang 600 nm jelas berkorelasi dengan kepekatan protein dalam air kencing. Lebih-lebih lagi, kerana persamaan pyrogallol merah kepada pecahan protein yang berbeza hampir sama, kaedah ini membolehkan untuk menentukan jumlah protein air kencing. Oleh itu, batasan nilai normal kepekatan protein dalam air kencing adalah 0.1 g / l (ia ditunjukkan dalam semua garis panduan Barat moden untuk diagnostik klinikal dan makmal, termasuk "Manual Klinikal untuk Ujian Makmal," disunting oleh N. Titsa). Ciri-ciri perbandingan kaedah pyrogallol dan sulfosalicylic untuk menentukan protein air kencing ditunjukkan dalam Jadual 1.

Sebagai kesimpulan, saya ingin sekali lagi memberi tumpuan kepada fakta bahawa apabila makmal pergi dari kaedah sulfosalicylic untuk menentukan protein air kencing ke kaedah pyrogallol, had nilai normal meningkat dengan ketara (dari 0.03 g / l kepada 0.1 g / l!). Kakitangan makmal ini sememangnya perlu memberitahu doktor, kerana Dalam keadaan ini, diagnosis proteinuria hanya boleh dibuat dalam kes apabila kandungan protein dalam air kencing melebihi 0.1 g / l.

Kami merawat hati

Rawatan, simptom, ubat

Pyrogallol penentuan protein merah dalam air kencing

02.26.2009

Kurilyak O.A., Ph.D.

Biasanya, protein diekskresikan dalam air kencing dalam jumlah yang agak kecil, biasanya tidak melebihi 100-150 mg / hari.

Diuresis harian dalam orang yang sihat adalah 1000-1500 ml / hari; Oleh itu, kepekatan protein di bawah keadaan fisiologi adalah 8-10 mg / dL (0.08-0.1 g / l).

Jumlah protein air kencing diwakili oleh tiga pecahan utama - albumin, mucoprotein dan globulin.

Albumin urin adalah bahagian albumin serum yang telah ditapis dalam glomeruli dan tidak diserap semula di tubula buah pinggang; Pengeluaran albumin kencing normal kurang dari 30 mg / hari. Satu lagi sumber utama protein dalam air kencing ialah tubulus buah pinggang, terutamanya bahagian distal tubula. Tubul ini merembes dua pertiga daripada jumlah protein kencing; daripada jumlah ini, kira-kira 50% diwakili oleh glikoprotein Tamm-Horsfall, yang dirembeskan oleh epitel tubulus distal dan memainkan peranan penting dalam pembentukan batu kencing. Protein lain terdapat di dalam air kencing dalam jumlah yang kecil dan berasal dari protein plasma berat molekul rendah yang ditapis melalui penapis buah pinggang, yang tidak diserap semula di tubula buah pinggang, mikroglobulin dari epitelium tubula buah pinggang (RTE), serta pelepasan prostat dan vagina.

Proteinuria, iaitu, peningkatan dalam kandungan protein dalam air kencing adalah salah satu gejala yang paling penting, yang mencerminkan kerosakan buah pinggang. Walau bagaimanapun, beberapa keadaan lain juga boleh disertai oleh proteinuria. Oleh itu, terdapat dua kumpulan utama proteinuria: proteinuria buah pinggang (benar) dan extrarenal (palsu).

Dalam proteinuria buah pinggang, protein memasuki air kencing terus dari darah kerana peningkatan kebolehtelapan penapis glomerular. Proteinuria renal sering dijumpai di glomerulonephritis, nephrosis, pyelonephritis, nephrosclerosis, amyloidosis buah pinggang, pelbagai bentuk nefropati, contohnya nefropati wanita hamil, keadaan demam, tekanan darah tinggi, dll. Proteinuria juga boleh didapati di kalangan orang yang sihat selepas melakukan senaman fizikal yang teruk, hipotermia, dan tekanan psikologi. Pada bayi yang baru lahir, proteinuria fisiologi diperhatikan pada minggu pertama kehidupan, dan apabila asthenia berlaku pada kanak-kanak dan remaja, proteinuria ortostatik (dalam kedudukan tegak badan) mungkin digabungkan dengan pertumbuhan pesat antara umur 7 dan 18 tahun.

Dalam kes proteinuria palsu (extrarenal), sumber protein dalam air kencing adalah campuran leukosit, eritrosit, sel epitelium urothelia saluran kencing. Pereputan unsur-unsur ini, terutamanya yang dinyatakan dengan air kencing alkali, membawa kepada kemasukan protein ke dalam air kencing, yang telah melewati penapis buah pinggang. Tahap utama proteinuria palsu memberikan darah dalam air kencing, dengan hematuria yang banyak, ia dapat mencapai 30 g / l dan lebih. Penyakit yang boleh disertai proteinuria extrarenal - urolithiasis, tuberkulosis buah pinggang, buah pinggang atau saluran kencing, sistitis, pyelitis, prostatitis, urethritis, vulvovaginitis.

Klasifikasi klinikal termasuk proteinuria cahaya (kurang daripada 0.5 g / hari), sederhana (dari 0.5 hingga 4 g / hari), atau teruk (lebih daripada 4 g / hari).

Kebanyakan pesakit dengan penyakit buah pinggang, seperti glomerulonephritis akut atau pyelonephritis, mendedahkan proteinuria sederhana, tetapi pesakit dengan sindrom nefrotik biasanya mengeluarkan lebih daripada 4 g protein dalam air kencing setiap hari.

Pelbagai kaedah digunakan untuk penentuan kuantitatif protein, khususnya kaedah Brandberg-Roberts-Stolnikov yang bersatu, kaedah biuret, kaedah asid sulfosalicylic, kaedah menggunakan pewarna biru Coomassie, pewarna merah pyrogallol, dan sebagainya.

Penggunaan pelbagai kaedah untuk menentukan protein dalam air kencing telah menyebabkan kekeliruan yang serius dalam tafsiran batasan kandungan protein dalam air kencing. Oleh kerana 2 kaedah yang paling biasa digunakan dalam makmal - dengan asid sulfosalicylic dan pewarna merah pyrogallol, kami menganggap masalah ketepatan batas-batas norma untuk mereka. Dari sudut pandangan kaedah sulfosalicylic dalam air kencing normal, kandungan protein tidak boleh melebihi 0.03 g / l, dan dari sudut pyrogallol, 0.1 g / l! Perbezaan tiga kali ganda.

Nilai rendah kepekatan normal protein dalam air kencing apabila menggunakan sulfosalicylic kerana perkara-perkara berikut:

  • keluk penentukuran adalah berdasarkan larutan akueus albumin. Urin dalam komposinya sangat berbeza dengan air: pH, garam, sebatian berat molekul yang rendah (kreatinin, urea, dan sebagainya). Akibatnya, menurut Altshuler, Rakov dan Tkachev, kesilapan dalam menentukan protein air kencing boleh 3 kali atau lebih! Ya Keputusan penentuan yang betul boleh diperolehi hanya dalam kes-kes tersebut apabila air kencing mempunyai berat badan yang sangat rendah dan dalam komposisi dan pendekatan air pH;
  • kepekaan yang lebih tinggi daripada kaedah sulfosalicylic kepada albumin berbanding dengan protein lain (pada masa itu, seperti yang disebutkan di atas, albumin dalam sampel air kencing yang normal tidak mengandungi lebih daripada 30% daripada jumlah protein air kencing);
  • jika pH urin dipindahkan ke sisi alkali, asid sulfosalicylic dinentralisasi, yang juga menyebabkan penurunan dalam penentuan protein;
  • Kadar pemendapan precipitates tertakluk kepada variasi yang ketara - pada kepekatan protein yang rendah, pemendakan menjadi perlahan, dan penamatan awal tindak balas mengarah kepada meremehkan hasilnya;
  • kadar tindak balas pemendakan pada dasarnya bergantung pada pencampuran campuran reaksi. Pada kepekatan protein yang tinggi, gemetar dari tiub boleh membawa kepada pembentukan kepingan besar dan hujan pesatnya.

Semua ciri-ciri yang disenaraikan di dalam kaedah ini membawa kepada pengurangan yang signifikan terhadap kepekatan protein yang ditentukan dalam air kencing. Tahap yang kurang dilaporkan amat bergantung kepada komposisi sampel air kencing tertentu. Oleh kerana kaedah asid sulfosalicylic memberikan nilai yang kurang konsentrasi terhadap kepekatan protein, batasan biasa untuk kaedah ini adalah 0.03 g / l, kira-kira tiga kali terlalu rendah berbanding dengan data yang diberikan dalam buku rujukan asing mengenai diagnostik makmal klinikal.

Kebanyakan makmal di negara Barat telah meninggalkan penggunaan kaedah sulfosalicylic untuk menentukan kepekatan protein dalam air kencing dan secara aktif menggunakan kaedah pyrogallol untuk tujuan ini. Kaedah pyrogallol untuk menentukan kepekatan protein dalam air kencing dan cecair biologi lain adalah berdasarkan prinsip fotometrik mengukur ketumpatan optik kompleks berwarna yang terbentuk oleh interaksi molekul protein dengan pewarna merah pyrogallol dan molekul kompleks natrium molibidat (Pyrogallol Red - Molybdate complex).

Mengapa kaedah pyrogallol membolehkan untuk mendapatkan keputusan yang lebih tepat untuk mengukur kepekatan protein dalam air kencing? Pertama, disebabkan oleh kepelbagaian pencairan sampel air kencing dalam campuran reaksi. Jika dalam kaedah sulfosalicylic nisbah sampel / reagen urin adalah 1/3, maka dalam kaedah pyrogallol ia boleh berada dalam julat dari 1 / 12.5 hingga 1/60, bergantung kepada varian teknik, yang dengan ketara mengurangkan kesan komposisi air kencing pada hasil pengukuran. Kedua, reaksi berlaku dalam penampan succinate, iaitu, pada pH yang stabil. Dan, akhirnya, prinsip prinsip itu boleh dikatakan lebih "telus". Sodium molybdate dan pyrogallol pewarna merah membentuk kompleks dengan molekul protein. Ini membawa kepada fakta bahawa molekul pewarna dalam keadaan bebas yang tidak menyerap cahaya pada panjang gelombang 600 nm dalam kombinasi dengan protein menyerap cahaya. Oleh itu, kita nampaknya menandakan setiap molekul protein dengan pewarna dan sebagai hasilnya kita dapati bahawa perubahan ketumpatan optik campuran tindak balas pada panjang gelombang 600 nm jelas berkorelasi dengan kepekatan protein dalam air kencing. Lebih-lebih lagi, kerana persamaan pyrogallol merah kepada pecahan protein yang berbeza hampir sama, kaedah ini membolehkan untuk menentukan jumlah protein air kencing. Oleh itu, batasan nilai normal kepekatan protein dalam air kencing adalah 0.1 g / l (ia ditunjukkan dalam semua garis panduan Barat moden untuk diagnostik klinikal dan makmal, termasuk "Manual Klinikal untuk Ujian Makmal," disunting oleh N. Titsa). Ciri-ciri perbandingan kaedah pyrogallol dan sulfosalicylic untuk menentukan protein air kencing ditunjukkan dalam Jadual 1.

Sebagai kesimpulan, saya ingin sekali lagi memberi tumpuan kepada fakta bahawa apabila makmal pergi dari kaedah sulfosalicylic untuk menentukan protein air kencing ke kaedah pyrogallol, had nilai normal meningkat dengan ketara (dari 0.03 g / l kepada 0.1 g / l!). Kakitangan makmal ini sememangnya perlu memberitahu doktor, kerana Dalam keadaan ini, diagnosis proteinuria hanya boleh dibuat dalam kes apabila kandungan protein dalam air kencing melebihi 0.1 g / l.

Doktor Hepatitis

rawatan hati

Protein biasa dalam kaedah pyrogallol air kencing

Orang yang sihat menghasilkan 1.0-1.5 liter air kencing setiap hari. Kandungan 8-10 mg / dl protein di dalamnya adalah fenomena fisiologi. Pengambilan harian protein dalam air kencing 100-150 mg tidak boleh menyebabkan kecurigaan. Globulin, mucoprotein dan albumin adalah apa yang membentuk jumlah protein dalam air kencing. Aliran keluar albumin yang besar menunjukkan pelanggaran proses penapisan di buah pinggang dan dipanggil proteinuria atau albuminuria.

Setiap bahan dalam air kencing diberi kadar "sihat", dan jika indeks protein berubah, ini mungkin menunjukkan patologi buah pinggang.

Urinalisis melibatkan penggunaan sama ada bahagian pertama (pagi), atau mengambil sampel harian. Yang terakhir adalah lebih baik untuk menilai tahap proteinuria, kerana kandungan protein telah diucapkan turun naik harian. Urin pada siang hari dikumpulkan dalam satu bekas, mengukur jumlah jumlah. Untuk makmal yang menjalankan analisis protein air kencing, satu sampel standard (dari 50 hingga 100 ml) dari bekas ini adalah mencukupi; jumlah baki tidak diperlukan. Untuk maklumat lanjut, ujian tambahan dilakukan pada Zimnitsky, yang menunjukkan sama ada penunjuk air kencing setiap hari adalah normal.

Kembali ke jadual kandungan

Protein dalam air kencing adalah normal pada orang dewasa tidak boleh melebihi 0.033 g / l. Pada masa yang sama kadar harian tidak lebih tinggi daripada 0.05 g / l. Bagi wanita hamil, kadar protein dalam air kencing setiap hari adalah lebih tinggi - 0.3 g / l., Dan pada waktu pagi air kencing adalah sama - 0.033 g / l. Standard protein berbeza dalam analisis umum air kencing dan kanak-kanak: 0.036 g / l untuk bahagian pagi dan 0.06 g / l sehari. Selalunya, makmal menjalankan analisis menggunakan dua kaedah, yang menunjukkan berapa banyak pecahan protein terkandung di dalam air kencing. Nilai normal di atas sah untuk analisis yang dijalankan dengan asid sulfosalicylic. Sekiranya pewarna merah pyrogallol digunakan, nilai-nilai itu akan berbeza tiga kali.

Kembali ke jadual kandungan

Penyebab protein dalam air kencing boleh menjadi proses patologi di buah pinggang:

  • penapisan di glomeruli buah pinggang pergi dengan cara yang salah;
  • penyerapan dalam tubulus protein terjejas;
  • Sesetengah penyakit mempunyai beban yang kuat di buah pinggang - apabila protein dalam darah meningkat, buah pinggang hanya tidak mempunyai masa untuk menyaringnya.

Sebab yang selebihnya dianggap sebagai bukan buah pinggang. Ini adalah bagaimana perkembangan albuminuria berfungsi. Protein dalam analisis air kencing muncul dalam reaksi alergi, epilepsi, kegagalan jantung, leukemia, keracunan, myeloma, kemoterapi, penyakit sistemik. Lebih sering daripada tidak, penunjuk sedemikian dalam analisis pesakit akan menjadi loceng pertama penyakit hipertensi.

Peningkatan protein dalam air kencing mungkin disebabkan oleh faktor-faktor yang tidak bersifat patologi, oleh itu analisis tambahan diperlukan. Kembali kepada jadual kandungan

Kaedah kuantitatif untuk penentuan protein dalam air kencing memberi kesilapan, oleh itu, disyorkan untuk melakukan beberapa analisis, dan kemudian gunakan formula untuk mengira nilai yang betul. Kandungan protein air kencing diukur dalam g / l atau mg / l. Petunjuk protein ini memungkinkan untuk menentukan tahap proteinuria, mencadangkan sebab, menganggarkan prognosis dan menentukan strategi.

Kembali ke jadual kandungan

Untuk fungsi penuh badan memerlukan pertukaran berterusan antara darah dan tisu. Ia hanya mungkin jika ada tekanan osmotik tertentu di dalam saluran darah. Protein plasma darah hanya mengekalkan tahap tekanan sedemikian, apabila bahan molekul rendah mudah luntur dari medium dengan kepekatannya yang tinggi ke medium dengan kepekatan yang lebih rendah. Kehilangan molekul protein menyebabkan pembebasan darah dari ranjangnya ke tisu, yang penuh dengan edema yang kuat. Ini adalah manifestasi proteinuria sederhana dan teruk.

Tahap awal albuminuria adalah asimtomatik. Pesakit memberi perhatian hanya kepada manifestasi penyakit yang mendasari, yang merupakan penyebab protein dalam air kencing.

Jejak proteinuria dipanggil peningkatan tahap protein dalam air kencing kerana penggunaan produk tertentu. Kembali ke kandungan

Urin untuk analisis dikumpulkan dalam bekas bersih dan skim. Sebelum mengumpul tandas ditunjukkan perineum, anda perlu mencuci dengan sabun dan air. Wanita dinasihatkan untuk menutup vagina dengan sekeping kapas atau tampon supaya pelepasan vagina tidak menjejaskan hasilnya. Pada malam itu adalah lebih baik untuk tidak minum alkohol, air mineral, kopi, pedas, masin dan makanan yang memberikan warna air kencing (blueberry, bit). aktiviti fizikal yang kuat, berjalan berpanjangan, tekanan, demam dan berpeluh, penggunaan berlebihan makanan protein atau ubat-ubatan sebelum penghantaran mencetuskan protein air kencing dalam sampel air kencing agak orang yang sihat. Fenomena yang dibenarkan ini dipanggil proteinuria jejak.

Kembali ke jadual kandungan

Penyakit buah pinggang yang membawa kepada kehilangan protein:

  • Amyloidosis. Sel-sel normal di buah pinggang digantikan oleh amyloid (kompleks protein-saccharide), yang menghalang tubuh daripada bekerja secara normal. Di peringkat proteinurik, amiloid disimpan dalam tisu ginjal, memusnahkan nefron dan, sebagai akibatnya, penapis buah pinggang. Jadi protein mendapat dari darah ke dalam air kencing. Tahap ini boleh bertahan lebih dari 10 tahun.
  • Nefropati diabetes. Oleh kerana metabolisme karbohidrat dan lipid yang tidak betul, saluran darah, glomeruli dan tubulus di buah pinggang dimusnahkan. Protein dalam air kencing adalah tanda pertama komplikasi diabetes.
  • Penyakit genesis keradangan - nefritis. Selalunya, lesi akan menjejaskan sistem saluran darah, glomeruli dan pektoral-pelvis, yang mengganggu sistem penapisan biasa.
  • Glomerulonephritis dalam kebanyakan kes adalah sifat autoimun. Pesakit mengadu tentang penurunan jumlah air kencing, sakit belakang dan peningkatan tekanan. Untuk rawatan glomerulonephritis mengesyorkan diet, rejimen dan terapi ubat.
  • Pyelonephritis. Dalam tempoh akut berlaku dengan gejala jangkitan bakteria: menggigil, mual, sakit kepala. Ini adalah penyakit berjangkit.
  • Penyakit ginjal polikistik.

Dalam tubuh yang sihat, molekul protein (dan saiznya agak besar) tidak boleh melalui sistem penapisan buah pinggang. Oleh itu, protein dalam air kencing tidak seharusnya. Penunjuk ini adalah sama untuk lelaki dan wanita. Jika analisis menunjukkan proteinuria, adalah penting untuk berunding dengan doktor untuk mengetahui sebab-sebabnya. Pakar akan menganggarkan betapa tinggi tahap protein, sama ada terdapat patologi bersamaan, bagaimana untuk memulihkan fungsi normal badan. Menurut statistik, seorang wanita mempunyai risiko penyakit urogenital yang lebih tinggi daripada lelaki.

Prinsip kaedah ini berdasarkan pembekuan protein dalam air kencing dengan kehadiran asid nitrik (atau 20% sulfosalicylic).

Kemajuan kerja: hingga 5 titis air kencing tambah 1-2 titis asid nitrik (atau sulfosalicylic). Di hadapan protein dalam air kencing muncul kekeruhan.

Jadual Pengesanan komponen patologi air kencing.

Nota: di hadapan glukosa dan protein dalam air kencing yang diperiksa, kandungan kuantitatif mereka ditentukan.

Prinsip kaedah ini: Apabila protein berinteraksi dengan pyrogallol merah dan natrium molybdate, kompleks berwarna dibentuk, keamatan warna, yang berkadaran dengan kepekatan protein dalam sampel.

Reagen: Reagen bekerja - larutan merah pyrogallol dalam penyangga succinate, penyelesaian protein penentukuran dengan kepekatan 0.50 g / l

Campurkan sampel, tunggu selama 10 minit. pada suhu bilik (18-25 ° C). Ukur kepadatan optik sampel (Dop) dan sampel penentukuran (Dk) terhadap sampel kawalan pada λ = 598 (578-610) nm. Pewarna stabil selama 1 jam.

Pengiraan: kepekatan protein dalam air kencing (C) g / l dikira dengan formula:

di mana: Dop = Dk = C = g / l.

Nilai biasa: sehingga 0.094 g / l, (0.141 g / hari)

Prinsip kaedah ini: Apabila D-glukosa dioksidakan oleh oksigen atmosfera di bawah tindakan oksidase glukosa, jumlah equimolar hidrogen peroksida terbentuk. Di bawah tindakan peroksidase, hidrogen peroksida mengoksidakan substrat kromogenik (campuran fenol dan 4 aminoantipirin - 4AG) dengan pembentukan produk berwarna. Keamatan warna adalah berkadar dengan kandungan glukosa.

Glukosa + O2 + H2O gluconolactone + H2O2

2H2O2 + phenol + 4AAP sebatian berwarna + 4H2O

Kemajuan kerja: 1 ml penyelesaian kerja dan 0.5 ml buffer fosfat dimasukkan ke dalam dua tiub. 0.02 ml air kencing ditambah ke tiub pertama, dan 0.02 ml calibrator ditambah kepada kedua (penentukuran, larutan glukosa piawai, 10 mmol / l). Sampel bercampur, diinkubasi selama 15 minit pada suhu 37 ° C dalam termostat, dan ketumpatan optik sampel percubaan (Dop) dan penentukuran (Dk) terhadap reagen kerja diukur pada panjang gelombang 500-546 nm.

Pengiraan: C = Dop / Dk  10 mmol / l Dop = Dk =

Kandungan glukosa dalam air kencing setiap hari ditentukan oleh mmol / hari dengan mendarabkan hasil yang diperolehi oleh jumlah air kencing yang dikumpulkan setiap hari.

Nota Apabila kandungan gula dalam air kencing lebih daripada 1%, ia mesti dicairkan.

Pada masa ini, makmal biokimia menggunakan kaedah bersatu untuk menganalisis urin untuk glukosa menggunakan ujian glukosa ujian glukosa reaktif atau menggunakan jalur ujian gabungan untuk PH, protein, glukosa, badan keton dan darah. Jalur ujian, direndam dalam sebuah kapal dengan air kencing selama 1 saat. dan bandingkan warna pada skala.

Penentuan protein menggunakan penunjuk merah pyrogallol

Prinsip kaedah ini adalah berdasarkan ukuran fotometrik ketumpatan optik daripada penyelesaian kompleks berwarna yang terbentuk oleh interaksi molekul protein dengan molekul kompleks pewarna merah pyrogallol dan natrium molybdate (kompleks Pyrogallol Red-Molybdate) dalam medium berasid. Keamatan warna penyelesaian adalah berkadar dengan kandungan protein dalam bahan di bawah kajian. Kehadiran detergen di dalam reagen memberikan takrifan yang setara dengan protein yang mempunyai sifat dan struktur yang berlainan.

Reagen. 1) 1.5 mmol / l larutan pyrogallol merah (PGK): 60 mg PGK dibubarkan dalam 100 ml metanol. Simpan pada suhu 0-5 ° C; 2) larutan penyangga 50 mmol / l succinate pH 2.5: 5.9 g asid succinic (HOOC - CH2 - CH2 - COOH); 0.14 g natrium oksalat (Na2C2O4) dan 0.5 g natrium benzoat (C6H5COONa) dibubarkan dalam 900 ml air suling; 3) larutan 10 mmol / l hidrat kristal natrium molybdate (Na2MoO4 × 2H2O): 240 mg natrium molibdat dibubarkan dalam 100 ml air suling; 4) Reagen bekerja: hingga 900 ml larutan penyumbat succinate tambah 40 ml larutan PHC dan 4 ml larutan natrium molibdat. PH larutan diselaraskan kepada 2.5 dengan larutan 0.1 mol / l asid hidroklorik (HCl) dan isipadunya diselaraskan kepada 1 l. Reagen dalam bentuk ini sedia untuk digunakan dan stabil apabila disimpan di tempat yang gelap dan pada suhu 2-25 ° C selama 6 bulan; 5) larutan albumin standard 0.5 g / l.

Kursus penentuan. 0.05 ml air kencing yang dikaji dimasukkan ke dalam tiub ujian pertama, 0.05 ml larutan piawai albumin ditambah pada tiub ujian kedua dan 0.05 ml air suling ke tiub ujian ketiga (sampel kawalan), maka 3 ml reagen bekerja ditambah pada tiub ujian ini. Kandungan tiub bercampur-campur dan selepas 10 minit, sampel dan piawai akan difotasikan dari sampel kawalan pada panjang gelombang 596 nm dalam cuvette dengan panjang jalur optik 10 mm.

Pengiraan kepekatan protein dalam sampel air kencing dianalisis mengikut formula:

C = 0.5 × Apr / Ast,

di mana C adalah kepekatan protein dalam sampel air kencing dianalisis, g / l; Apr dan Ast - kepupusan sampel air kencing dan larutan albumin standard, g / l; 0.5 - kepekatan larutan albumin standard, g / l.

  • warna penyelesaian (kompleks warna) stabil selama satu jam;
  • hubungan berkadar secara langsung antara kepekatan protein dalam sampel dan penyerapan larutan bergantung kepada jenis fotometer;
  • apabila kandungan protein dalam air kencing berada di atas 3 g / l, sampel dicairkan dengan larutan natrium klorida isotonik (9 g / l) dan penentuannya diulang. Tahap pencairan diambil kira apabila menentukan kepekatan protein.
  • Penentuan protein air kencing
  • Percubaan Asid Sulfosalicylic Bersepadu
  • The Unified Brandberg - Roberts - Stolnikov Method
  • Menentukan jumlah protein dalam air kencing dengan tindak balas dengan asid sulfosalicylic
  • Kaedah Biuret
  • Pengesanan dalam air kencing protein Bens - Jones

Proteinuria - fenomena di mana protein dikesan dalam air kencing, yang menunjukkan kemungkinan kerosakan buah pinggang, adalah faktor dalam perkembangan penyakit jantung, saluran darah, saluran limfa.

Pengesanan protein dalam air kencing tidak selalu menunjukkan penyakit. Fenomena yang sama adalah tipikal walaupun untuk orang yang benar-benar sihat, di mana protein air kencing dapat dikesan. Hypothermia, usaha fizikal, penggunaan makanan protein membawa kepada kemunculan protein dalam air kencing, yang hilang tanpa sebarang rawatan.

Semasa pemeriksaan, 17% orang yang sihat boleh menentukan protein, tetapi hanya 2% daripada jumlah orang yang menunjukkan hasil ujian positif sebagai tanda penyakit buah pinggang.

Molekul protein tidak boleh masuk ke dalam darah. Mereka adalah penting untuk badan - ia adalah bahan binaan untuk sel, mengambil bahagian dalam reaksi sebagai koenzim, hormon, antibodi. Dalam kedua-dua lelaki dan wanita, kadar adalah ketiadaan lengkap protein dalam air kencing.

Fungsi pencegahan kehilangan molekul protein oleh tubuh dilakukan oleh buah pinggang.

Dua sistem ginjal terlibat dalam menapis air kencing:

  1. glomeruli - jangan biarkan dalam molekul besar, tetapi jangan mengekalkan albumin, globulin - sebahagian kecil daripada molekul protein;
  2. tubulus buah pinggang - menyerap protein glomeruli ditapis, kembali ke sistem peredaran darah.

Albumin (kira-kira 49%), mucoprotein, globulin terdapat di dalam air kencing, di mana bahagian imunoglobulin menyumbang kira-kira 20%.

Globulins - protein whey dalam berat molekul tinggi, yang dihasilkan dalam sistem imun dan hati. Kebanyakannya disintesis oleh sistem imun, merujuk kepada immunoglobulin atau antibodi.

Albumin adalah sebahagian daripada protein yang mula-mula muncul dalam air kencing walaupun dengan kerosakan buah pinggang yang kecil. Ada beberapa albumin dalam air kencing yang sihat, tetapi ia tidak begitu penting sehingga ia tidak dapat dikesan melalui diagnosis makmal.

Ambang yang lebih rendah yang boleh dikesan menggunakan diagnostik makmal adalah 0.033 g / l. Jika lebih daripada 150 mg protein hilang setiap hari, mereka bercakap tentang proteinuria.

Data protein asas untuk air kencing

Penyakit dengan proteinuria ringan adalah asimtomatik. Secara visual, air kencing tanpa protein tidak boleh dibezakan daripada air kencing, di mana terdapat sedikit protein. Beberapa air kencing berbuih sudah menjadi proteinuria yang tinggi.

Adalah mungkin untuk menganggap zat protein aktif dalam air kencing oleh penampilan pesakit hanya dengan tahap sederhana atau teruk penyakit akibat penampilan edema pada kaki, muka, perut.

Pada peringkat awal penyakit, berikut mungkin tanda-tanda proteinuria tidak langsung:

  • perubahan warna air kencing;
  • peningkatan kelemahan;
  • kekurangan selera makan;
  • mual, muntah;
  • sakit tulang;
  • mengantuk, pening;
  • suhu tinggi.

Kemunculan tanda-tanda seperti itu tidak boleh diabaikan, terutamanya semasa kehamilan. Ini mungkin bermaksud sedikit penyelewengan dari norma, dan mungkin merupakan gejala untuk mengembangkan preeklampsia, preeklampsia.

Penilaian kuantitatif kehilangan protein bukanlah tugas yang mudah, untuk mencapai gambaran yang lebih lengkap tentang keadaan pesakit, beberapa ujian makmal digunakan.

Kesukaran memilih kaedah untuk mengesan protein berlebihan dalam air kencing dijelaskan oleh:

  • kepekatan protein rendah, yang memerlukan instrumen ketepatan tinggi untuk pengiktirafan;
  • komposisi air kencing, merumitkan tugas, kerana ia mengandungi bahan yang memutarbelitkan hasilnya.

Maklumat terperinci disediakan oleh analisis air kencing pagi yang pertama, yang dikumpulkan selepas terbangun.

Pada malam sebelum analisis, syarat berikut mesti dipenuhi:

  • Jangan makan pedas, goreng, makanan protein, alkohol;
  • tidak termasuk diuretik selama 48 jam;
  • had aktiviti fizikal;
  • hati-hati ikut peraturan kebersihan diri.

Air kencing pagi adalah yang paling bermaklumat, kerana ia adalah jangka panjang dalam pundi kencing, kurang bergantung kepada pengambilan makanan.

Adalah mungkin untuk menganalisis jumlah protein dalam air kencing secara rawak, yang diambil pada bila-bila masa, tetapi analisis ini kurang bermaklumat, semakin tinggi kemungkinan kebarangkalian.

Untuk mengira kehilangan protein setiap hari, analisis air kencing setiap hari dilakukan. Untuk melakukan ini, dalam masa 24 jam dikumpulkan dalam bekas plastik khas semua air kencing diperuntukkan untuk hari itu. Anda boleh mula mengutip pada bila-bila masa. Keadaan utama - tepat hari pengumpulan.

Takrif kualitatif proteinuria adalah berdasarkan penentuan protein oleh faktor fizikal atau kimia. Kaedah kualitatif berkaitan dengan pemeriksaan, yang membolehkan untuk mewujudkan kehadiran protein dalam air kencing, tetapi tidak memberi peluang untuk menilai tahap proteinuria secara tepat.

Contoh yang digunakan:

  • dengan mendidih;
  • asid sulfosalicylic;
  • asid nitrik, larutan larionik pada sampel cincin Heller.

Sampel dengan asid sulfosalicylic dilakukan dengan membandingkan sampel air kencing dengan yang berpengalaman, di mana 7-8 tetes 20% asid sulfosalicylic ditambah ke dalam air kencing. Kesimpulan tentang kehadiran protein dibuat mengikut keamatan kekeruhan yang berlebihan yang muncul di dalam tiub ujian semasa tindak balas.

Ujian Geller lebih biasa menggunakan 50% asid nitrik. Kepekaan kaedah ini ialah 0.033 g / l. Pada kepekatan protein dalam tiub ujian dengan sampel air kencing dan reagen selama 2-3 minit selepas permulaan percubaan, cincin benang putih muncul, pembentukannya menunjukkan kehadiran protein.

Kaedah kuantitatif termasuk:

  • kaedah untuk menentukan protein dalam ujian air kencing;
  • Kaedah Brandberg-Roberts-Stolnikov.

Kaedah penentuan mengikut kaedah Brandberg-Roberts-Stolnikov didasarkan pada kaedah cincin Geller, tetapi membolehkan seseorang untuk lebih tepat menganggarkan jumlah protein. Apabila melakukan ujian menggunakan teknik ini dengan beberapa cecair air kencing, cincin protein filamen muncul dalam selang masa antara 2-3 minit dari awal ujian.

Dalam praktiknya, kaedah ujian jalur dengan pewarna biru bromophenol yang digunakan digunakan sebagai penunjuk. Kekurangan jalur ujian adalah kepekaan terpilih terhadap albumin, yang menyebabkan gangguan pada hasil peningkatan kes kepekatan globin atau protein lain.

Kelemahan kaedah ini juga termasuk sensitiviti yang agak rendah terhadap ujian ke protein. Jalur ujian mula bertindak balas terhadap kehadiran protein dalam air kencing pada kepekatan protein lebih besar daripada 0.15 g / l.

Kaedah penilaian kuantitatif boleh dibahagikan kepada:

Kaedah adalah berdasarkan sifat protein untuk mengurangkan kelarutan di bawah tindakan agen yang mengikat dengan pembentukan sebatian yang tidak larut.

Ejen yang menyebabkan protein mengikat, boleh:

  • asid sulfosalicylic;
  • asid trichloroacetic;
  • benzethonium chloride.

Pada keputusan ujian, kesimpulan dibuat berdasarkan tahap pengecilan fluks cahaya dalam sampel dengan penggantungan berbanding dengan kawalan. Hasil dari kaedah ini tidak boleh selalu dikaitkan dengan dipercayai kerana perbezaan dalam keadaan: kecepatan pencampuran reaktan, suhu, keasaman medium.

Kesan ke atas penilaian pengambilan ubat hari sebelum, sebelum menjalankan ujian menggunakan kaedah ini, tidak boleh diambil:

  • antibiotik;
  • sulfonamides;
  • ubat yang mengandungi yodium.

Kaedah merujuk kepada kos yang tersedia, yang membolehkan ia digunakan secara meluas untuk pemeriksaan. Tetapi hasil yang lebih tepat boleh didapati dengan menggunakan teknik warna lebih mahal.

Kaedah sensitif yang tepat menentukan kepekatan protein dalam air kencing termasuk kaedah warna.

Anda boleh melakukannya dengan ketepatan yang tinggi:

  • reaksi biuret;
  • teknik Lowry;
  • Teknik pewarnaan yang menggunakan pewarna yang membentuk kompleks dengan protein air kencing yang berbeza secara visual dari sampel.

Kaedah colorimetric untuk mengesan protein dalam air kencing

Kaedah merujuk kepada yang dipercayai, sangat sensitif, membolehkan untuk menentukan dalam albumin urin, globulin, paraprotein. Ia digunakan sebagai kaedah utama untuk menjelaskan keputusan ujian kontroversial, serta protein air kencing harian pada pesakit dengan jabatan-jabatan nefrological hospitals.

Hasil yang lebih tepat dapat dicapai oleh kaedah Lowry, yang berdasarkan reaksi biuret, serta tindak balas Folin, yang mengiktiraf tryptophan dan tirosin dalam molekul protein.

Untuk menghapus kesilapan yang mungkin, sampel air kencing dimurnikan oleh dialisis daripada asid amino, asid urik. Kesilapan boleh dilakukan dengan penggunaan salisilat, tetracyclines, chlorpromazine.

Kaedah yang paling tepat untuk menentukan protein adalah berdasarkan kepada harta untuk mengikat kepada pewarna yang digunakan:

  • ponso;
  • Coomassie biru yang cemerlang;
  • merah pyrogallic.

Pada siang hari, jumlah protein yang dikumuhkan di dalam air kencing berbeza-beza. Untuk lebih objektif menilai kehilangan protein dalam air kencing, memperkenalkan konsep protein harian dalam air kencing. Nilai ini diukur dalam g / hari.

Untuk penilaian cepat protein harian dalam air kencing, jumlah protein dan kreatinin ditentukan dalam satu bahagian air kencing, maka nisbah protein / kreatinin dikira berdasarkan kehilangan protein setiap hari.

Kaedah ini berdasarkan fakta bahawa kadar kencing kreatinin kencing adalah malar, ia tidak berubah pada siang hari. Dalam orang yang sihat, nisbah normal protein: kreatinin dalam air kencing adalah 0.2.

Kaedah ini menghapuskan kemungkinan kesalahan yang mungkin berlaku apabila mengumpul air kencing setiap hari.

Ujian kualitatif lebih kerap daripada ujian kuantitatif memberikan hasil negatif palsu atau palsu. Kesalahan berlaku berkaitan dengan ubat, tabiat pemakanan, aktiviti fizikal pada malam sebelum analisis.

Penyahkodan ujian kualitatif ini diberikan oleh penilaian visual kekeruhan dalam tabung uji berbanding dengan hasil ujian dengan kawalan:

  1. reaksi positif yang lemah dianggarkan sebagai +;
  2. positif ++;
  3. sangat positif +++.

Uji cincin Geller lebih tepat menilai kehadiran protein dalam air kencing, tetapi tidak membenarkan mengukur protein dalam air kencing. Seperti ujian asid sulfosalicylic, ujian Geller hanya memberikan gambaran kasar mengenai kandungan protein air kencing.

Kaedah ini membolehkan untuk menilai tahap proteinuria secara kuantitatif, tetapi terlalu memakan masa, tidak tepat, kerana dengan pencairan yang kuat, ketepatan penilaian menurun.

Untuk mengira protein, anda perlu mengalikan tahap pencairan air kencing dengan 0, 033 g / l:

Ujian tidak memerlukan syarat khas, prosedur ini mudah dilakukan di rumah. Untuk melakukan ini, anda perlu menurunkan jalur ujian ke dalam air kencing selama 2 minit.

Hasilnya akan dinyatakan dengan jumlah tambah pada jalur, pengekodan yang terkandung di dalam jadual:

  1. Hasil ujian yang bersamaan dengan nilai sehingga 30 mg / 100 ml sesuai dengan proteinuria fisiologi.
  2. Nilai pada jalur ujian 1+ dan 2 ++ menunjukkan proteinuria yang ketara.
  3. Nilai 3 +++, 4 ++++ ditandai dengan proteinuria patologi yang disebabkan oleh penyakit buah pinggang.

Jalur ujian hanya boleh menentukan kadar peningkatan protein dalam air kencing. Untuk diagnosis yang tepat, mereka tidak digunakan, dan lebih-lebih lagi mereka tidak boleh mengatakan apa maksudnya.

Jangan biarkan jalur ujian mencukupi untuk menilai jumlah protein dalam air kencing pada wanita hamil. Kaedah penilaian yang lebih dipercayai ialah penentuan protein dalam air kencing setiap hari.

Penentuan protein air kencing menggunakan jalur ujian:

Protein harian dalam air kencing adalah diagnosis yang lebih tepat mengenai penilaian keadaan berfungsi buah pinggang. Untuk ini anda perlu mengumpul semua air kencing yang dikumuhkan oleh buah pinggang setiap hari.

Kandungan protein dalam air kencing boleh didapati dengan nisbah protein: kreatinin, data ditunjukkan dalam jadual:

Nilai yang sah untuk nisbah protein / kreatinin ialah data dalam jadual:

Dengan kehilangan lebih daripada 3.5 g protein setiap hari, keadaan ini dipanggil proteinuria besar-besaran.

Sekiranya terdapat banyak protein dalam air kencing, pemeriksaan semula diperlukan selepas 1 bulan, kemudian selepas 3 bulan, mengikut keputusan, yang menentukan mengapa norma melebihi.

Sebab-sebab peningkatan protein dalam air kencing adalah peningkatan pengeluaran dalam tubuh dan fungsi buah pinggang terjejas, proteinuria dibezakan:

  • fisiologi - penyelewengan kecil dari norma disebabkan oleh proses fisiologi, diselesaikan secara spontan;
  • patologi - perubahan disebabkan akibat proses patologi di buah pinggang atau organ lain badan, tanpa rawatan berlanjutan.

Peningkatan sedikit protein dapat dilihat dengan pemakanan protein yang berlimpah, luka bakar mekanikal, kecederaan, disertai dengan peningkatan pengeluaran imunoglobulin.

A proteinuria ringan mungkin disebabkan oleh senaman fizikal, tekanan psiko-emosi, atau mengambil ubat-ubatan tertentu.

Proteinuria fisiologi adalah peningkatan dalam protein air kencing pada kanak-kanak pada hari pertama selepas kelahiran. Tetapi selepas seminggu hidup, kandungan protein dalam air kencing seorang kanak-kanak dianggap sebagai penyimpangan dari norma dan menunjukkan patologi yang berkembang.

Penyakit buah pinggang, penyakit berjangkit juga kadang-kadang disertai dengan penampilan protein dalam air kencing.

Keadaan seperti biasanya sesuai dengan kadar proteinuria yang rendah, adalah fenomena sementara, dengan cepat menyebarkan diri mereka sendiri, tanpa memerlukan rawatan khusus.

Keadaan yang lebih teruk, proteinuria teruk dicatat dalam kes:

  • glomerulonephritis;
  • diabetes;
  • penyakit jantung;
  • kanser pundi kencing;
  • pelbagai myeloma;
  • jangkitan, kerosakan dadah, penyakit ginjal polikistik;
  • tekanan darah tinggi;
  • sistemik lupus erythematosus;
  • Sindrom Goodpasture.

Halangan usus, kegagalan jantung, dan hipertiroidisme boleh menyebabkan jejak protein dalam air kencing.

Varieti proteinuria dikelaskan dalam beberapa cara. Untuk penilaian kualitatif protein, seseorang boleh menggunakan klasifikasi Yaroshevsky.

Dengan sistematik Yaroshevsky, dicipta pada tahun 1971, membezakan proteinuria:

  1. buah pinggang - yang termasuk pelanggaran penapisan glomerular, pelepasan protein tubula, kekurangan penjerapan semula protein dalam tubul;
  2. prerenal - berlaku di luar buah pinggang, perkumuhan hemoglobin, protein yang berlebihan dalam darah akibat pelbagai myeloma;
  3. Postrenal - berlaku di tapak saluran kencing selepas buah pinggang, perkumuhan protein dalam kemusnahan organ-organ kencing.

Untuk penilaian kuantitatif mengenai apa yang berlaku, derajat proteinuria yang bersyarat dipisahkan. Perlu diingati bahawa mereka boleh dengan mudah melangkah lebih berat tanpa rawatan.

Tahap proteinuria yang paling teruk berkembang dengan kehilangan lebih daripada 3 g protein setiap hari. Kehilangan protein dari 30 mg hingga 300 mg sehari sepadan dengan tahap sederhana atau mikroalbumuria. Sehingga 30 mg protein dalam air kencing setiap hari bermakna proteinuria ringan.

Protein norma dalam air kencing berapa banyak?

    Protein normal dalam air kencing tidak praktikal (kurang daripada 0.002 g / l). Walau bagaimanapun, dalam beberapa keadaan, sedikit protein boleh muncul di dalam air kencing pada individu yang sihat selepas pengambilan makanan protein yang besar, akibat penyejukan, dengan tekanan emosi, tenaga fizikal yang berkemanjangan (proteinuria marching yang dipanggil).

Kemunculan sejumlah besar protein dalam air kencing (proteinuria) adalah patologi. Penyebab proteinuria boleh menjadi penyakit buah pinggang (glomerulonephritis akut dan kronik, pyelonephritis, nefropati hamil, dll.) Atau saluran kencing (keradangan pundi kencing, prostat, ureter). Proteinuria buah pinggang boleh menjadi organik (glomerular, tiub dan berlebihan) dan berfungsi (proteinuria febrile, ortostatik pada remaja, apabila bayi berlebihan, pada bayi yang baru lahir). Proteinuria berfungsi tidak dikaitkan dengan patologi buah pinggang. Jumlah harian protein bervariasi pada pesakit dari 0.1 hingga 3.0 g atau lebih. Komposisi protein air kencing ditentukan oleh elektroforesis. Penampilan dalam air kencing protein Bens-Jones adalah ciri myeloma dan Waldenstrom macroglobulinemia, # 223; 2 mikroglobulin dalam kes kerosakan pada tubulus buah pinggang.

  • Protein normal dalam air kencing tidak praktikal (kurang daripada 0.002 g / l).
  • Tanda-tanda utama penyakit yang dikesan dalam kajian air kencing.

    SG Berat tertentu. Pengurangan dalam berat badan tertentu menunjukkan pengurangan keupayaan buah pinggang untuk memusatkan air kencing dan menghilangkan toksin dari badan, yang berlaku dalam kes kegagalan buah pinggang. Peningkatan berat badan tertentu dikaitkan dengan sejumlah besar gula dalam air kencing, garam. Perlu diingatkan bahawa adalah mustahil untuk menilai graviti spesifik untuk hanya satu ujian air kencing, mungkin terdapat perubahan rawak, perlu mengulang analisis air kencing 1-2 kali.

    Protein Protein dalam air kencing - proteinuria. Penyebab proteinuria boleh merosakkan buah pinggang sendiri dalam nefritis, amyloidosis, dan kerosakan oleh racun. Protein dalam air kencing mungkin juga muncul disebabkan oleh penyakit saluran kencing (pyelonephritis, cystitis, prostatitis).

    Glukosa Glukosa (gula) dalam air kencing - glycosuria - selalunya disebabkan oleh kencing manis. Penyebab yang jarang adalah kekalahan tubulus buah pinggang. Ia sangat mengganggu jika badan ketone dikesan bersama gula dalam air kencing. Ini berlaku dengan diabetes mellitus yang teruk dan tidak senonoh dan merupakan komplikasi komplikasi penyakit kencing manis yang paling teruk - koma diabetik.

    Bilirubin, Urobilinogen Bilirubin dan urobilin ditentukan dalam air kencing dalam pelbagai bentuk penyakit kuning.

    Erythrocytes Erythrocytes dalam air kencing - hematuria. Ini berlaku sama ada dengan kekalahan buah pinggang sendiri, selalunya dengan keradangan mereka, atau pada pesakit dengan penyakit saluran kencing. Jika, sebagai contoh, batu bergerak di sepanjang mereka, ia boleh mencederakan membran mukus, akan ada sel darah merah dalam air kencing. Tumor buah pinggang yang mereput juga boleh menyebabkan hematuria.

    Leukosit Leukosit dalam air kencing - leukocyturia, selalunya akibat perubahan radang dalam saluran kencing pada pesakit dengan pyelonephritis, cystitis. Leukosit sering ditentukan oleh keradangan organ kelamin wanita luar, pada lelaki, oleh keradangan kelenjar prostat.

    Silinder Cylinder adalah struktur mikroskopik yang pelik. Silinder hyaline dalam jumlah 1-2 boleh berada dalam orang yang sihat. Mereka terbentuk dalam tubulus buah pinggang, ia tersekat bersama zarah protein. Tetapi peningkatan jumlah mereka, silinder jenis lain (granular, erythrocyte, lemak) selalu menunjukkan kerosakan tisu ginjal itu sendiri. Terdapat silinder dalam penyakit keradangan ginjal, lesi metabolik, seperti kencing manis.

    Kaedah yang bermaklumat dan hadnya. Kandungan maklumat ujian air kencing umum untuk pengiktirafan penyakit tertentu buah pinggang adalah rendah, biasanya memerlukan kajian tambahan dan lebih tepat. Tetapi penyelidikan sangat penting, terutamanya apabila menjalankan kajian pencegahan, kerana ia membolehkan untuk mengenal pasti tanda-tanda awal penyakit buah pinggang. Ia juga diketahui bahawa sering penyakit buah pinggang tersembunyi, dan hanya kajian kencing membolehkan mereka mengesyaki dan menjalankan pemeriksaan yang diperlukan lagi.

    Di kebanyakan makmal, ketika memeriksa air kencing untuk protein, gunakan reaksi kualitatif pertama yang tidak mengesan protein dalam air kencing seorang yang sihat. Jika protein dalam air kencing dikesan oleh tindak balas kualitatif, penentuan kuantitatif (atau separuh kuantitatif) dijalankan. Pada masa yang sama, ciri-ciri kaedah yang digunakan meliputi spektrum yang berbeza uroprotein adalah penting. Oleh itu, apabila menentukan protein menggunakan 3% asid sulfosalicylic, jumlah protein dianggap normal sehingga 0.03 g / l, manakala menggunakan kaedah pyrogallol, had nilai protein normal meningkat kepada 0.1 g / l. Dalam hal ini, dalam bentuk analisis adalah perlu untuk menunjukkan nilai normal protein untuk kaedah yang digunakan oleh makmal.

    Apabila menentukan jumlah minimum protein, disarankan untuk mengulangi analisis; jika ragu-ragu, kehilangan protein harian dalam air kencing harus ditentukan. Urin harian biasa mengandungi protein dalam kuantiti yang kecil. Di bawah keadaan fisiologi, protein yang ditapis hampir sepenuhnya diserap oleh epitelium tubulus proximal dan kandungannya dalam jumlah harian urin berbeza mengikut pengarang berbeza dari jejak hingga 20 50, 80 100 mg dan 150 hingga 200 mg. Sesetengah penulis percaya bahawa perkumuhan harian protein dalam jumlah 30 50 mg / hari adalah norma fisiologi untuk orang dewasa. Lain-lain percaya bahawa perkumuhan protein kencing tidak boleh melebihi 60 mg / m2 permukaan badan setiap hari, tidak termasuk bulan pertama kehidupan, apabila nilai proteinuria fisiologi dapat empat kali lebih tinggi daripada nilai yang ditentukan.

    Keadaan umum untuk penampilan protein dalam air kencing seseorang yang sihat adalah kepekatan mereka yang agak tinggi dalam darah dan berat molekul tidak melebihi 100,200 kDa.

  • ini bukan perkara biasa, dengan diagnosis anda mungkin, satu perkara lagi ialah untuk sindrom nefrotik itu sebenarnya penunjuk kecil.. melihat klinik - edema, tekanan, dll, terus mengambil rawatan yang ditetapkan..
  • dan saya akan katakan: TIDAK OK!
  • Kenapa ujian menemui lendir di dalam air kencing?

    Kebocoran air kencing semasa mengandung